大赛璐色谱柱在实际操作过程中,用户可能会遇到各种各样的问题,如峰形异常、保留时间变化或压力升高。本文将详细探讨这些常见问题及其相应的解决方法,帮助您更好地维护和使用
大赛璐色谱柱。

1、峰形异常
现象描述:出现拖尾峰、前沿峰或分裂峰等异常峰形。
原因分析与解决方法:
拖尾峰:通常是由于样品与固定相之间的相互作用过强所致。可以通过调整流动相pH值或添加适当的改性剂(如三乙胺)来改善峰形。此外,检查样品是否溶解也是关键,必要时可尝试更换溶剂。
前沿峰:表明样品在柱子上的保留不足,可能是由于流动相强度过高。适当降低有机相比例或增加缓冲盐浓度可以缓解这一问题。
分裂峰:可能由柱床不均匀或样品中有杂质引起。确保柱子正确安装且未受损,并通过预处理步骤去除样品中的杂质。
2、保留时间变化
现象描述:样品的保留时间不稳定,出现提前或延迟现象。
原因分析与解决方法:
温度波动:温度对保留时间有显著影响,因此应保持恒温箱温度稳定。建议使用带有温度控制功能的HPLC系统,并定期校准温度传感器。
流动相组成改变:检查流动相的比例是否一致,特别是当使用自动进样器时,需确保每次进样的流动相混合比例相同。如果使用梯度洗脱,还需确认梯度程序设置无误。
柱效下降:随着使用时间增长,大赛璐色谱柱可能会逐渐失去效率,导致保留时间漂移。此时应考虑清洗或再生,甚至更换新柱。
3、系统压力升高
现象描述:泵出口压力突然上升,超过正常范围。
原因分析与解决方法:
柱头堵塞:颗粒物或其他杂质进入柱内可能导致堵塞。先关闭系统并卸下色谱柱,用注射器反向冲洗柱子以清除堵塞物。若无效,则需拆开柱头进行清洁。
过滤头或管路堵塞:检查所有在线过滤器、进样针和连接管路是否有堵塞迹象。必要时更换新的过滤头或清洗相关部件。
溶剂质量不佳:使用低纯度溶剂会引入微小颗粒,造成系统压力升高。确保所用溶剂经过充分过滤,并选择高质量的试剂供应商。