PGE2试剂盒 联科 EK8103
是前列腺素E2(PGE2)固相竞争法ELISA检测试剂盒,是针对人、小鼠、大鼠样本的高灵敏度科研级检测试剂,已被60+篇SCI文献引用验证。
产品参数
品牌产地:杭州联科生物,国产原厂出品
常规规格:96孔可拆板,另有48孔小规格可选
检测种属:已验证人、小鼠、大鼠血清/血浆样本,其他哺乳动物样本可通过预实验适配
样本类型:血清、血浆、细胞培养上清及各类生物体液样本
最小样本量:血清/血浆仅需5μl,经200倍预稀释后即可上样检测
灵敏度:1.08pg/ml,远低于常规同类试剂盒的检测下限
检测范围:31.25-2000pg/ml,部分批次优化后可达15.63-2000pg/ml
精密度表现:板内变异系数3.9%-4.3%,板间变异系数5.2%-6.5%
回收率:92%-102%,平均回收率99%,检测结果稳定性优异
保存运输:未拆封时-20℃避光保存,采用干冰全程冷链运输,有效期12个月
核心性能深度参数
1.检测逻辑特殊性:作为小分子检测试剂盒,采用竞争法原理,显色OD值越低,样本中PGE2浓度越高,和常规双抗夹心法的正相关逻辑相反,数据解读时需特别注意。
2.精准度表现:板内变异系数仅3.9%-4.3%,板间变异系数5.2%-6.5%,远低于行业通用10%的合格阈值,重复实验数据稳定性max强。
3.回收率范围:92%-102%,平均回收率99%,血清、细胞上清等不同基质样本的检测偏差极小。
4.标准曲线适配:必须使用四参数逻辑回归(4-PL)拟合,不能用简单线性拟合,可覆盖31.25-2000pg/ml的全检测范围,高低浓度点无明显偏差。
全流程标准操作步骤
1.试剂准备:所有组分提前从冰箱取出,室温平衡30min;20×浓缩洗涤液用去离子水稀释成1×工作液,标准品用样本的稀释液进行梯度复溶,配制出7个浓度梯度的标准品系列。
2.抗体预结合:每孔加入50μl检测抗体,封板后室温孵育1h,洗涤3次拍干。
3.竞争反应:每孔依次加入50μl梯度标准品/预处理后的样本、50μl生物su标记PGE2,封板后室温孵育2h,洗涤3次拍干。
4.酶促反应:每孔加入100μl链霉亲和素-HRP,封板后室温避光孵育30min,洗涤5次拍干。
5.显色终止:每孔加入100μl TMB显色液,室温避光孵育15-30min,待标准曲线高浓度孔出现明显黄色梯度后,每孔加入50μl终止液终止反应。
6.读数计算:15min内用酶标仪在450nm主波长、570-630nm参考波长下读取吸光值,用四参数拟合标准曲线,代入计算得到样本中PGE2的实际浓度。
实验数据不稳的核心避坑要点
1.PGE2体内半衰期仅几分钟,样本离体后必须1h内完成分离分装,不能室温久放,否则指标会快速降解导致结果严重偏低。
2.所有样本严禁反复冻融,反复冻融3次以上PGE2损失率会超过50%,必须提前分装成单次使用的小份冻存。
3.洗板步骤必须做到每孔洗涤液加满,拍干时用干净吸水纸,避免残留液体和交叉污染,否则背景值会异常偏高。
4.孵育全程严格避光,TMB显色时间必须统一控制,不同孔显色时长不一致会直接导致OD值偏差,数据就失去了参考意义。
通用基础科研场景
1.炎症机制研究:覆盖消化道炎症、呼吸道炎症、皮肤炎症等各类炎症模型,定量检测血清、组织匀浆中PGE2的浓度变化,解析花生四烯酸代谢通路的激活规律。
2.肿瘤免疫微环境研究:检测肿瘤组织、肿瘤细胞培养上清中的PGE2水平,研究其对免疫抑制微环境的调控作用,支撑肿瘤免疫相关药物的药效评价。
3.生殖生理研究:用于分娩启动、子宫内膜相关研究,定量检测生殖系统组织液中PGE2的表达变化,解析其对子宫平滑肌收缩的调控机制。