诺唯赞 试剂盒货号为MR101-01

产品型号：

所属分类：试剂盒

更新时间：2026-09-09

简要描述：诺唯赞 试剂盒货号为MR101-01
是专门适配茎环法的miRNA专用cDNA一链合成试剂盒，核心用于miRNA的特异性逆转录。

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诺唯赞 试剂盒货号为MR101-01

是专门适配茎环法的miRNA专用cDNA一链合成试剂盒，核心用于miRNA的特异性逆转录。

产品全称‌：miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

‌品牌‌：诺唯赞（Vazyme）

‌货号‌：MR101-01

‌规格‌：50 rxns（单次反应体系为20μl）

‌产地‌：南京

‌保存条件‌：-20℃避光密封保存，库存充足

‌产品类型‌：microRNA茎环法专用逆转录试剂盒

核心性能优势

1.‌优异的线性范围‌：在宽广的模板浓度区间内保持良好线性，min低可检出pg级别的微量RNA模板

2.‌快速gDNA去除‌：42℃条件下2分钟即可快速清除基因组DNA污染，避免后续qPCR出现非特异性扩增

3.‌高特异性逆转录‌：基于HiScript II高热稳定性逆转录酶，搭配优化缓冲体系，大幅提升miRNA特异性逆转录产物生成效率

4.‌配套工具‌：提供免费的茎环引物和定量引物设计软件，大幅降低miRNA引物设计门槛

推荐反应程序

1. 25℃ 孵育5分钟，完成茎环引物与miRNA模板的结合

2. 42℃ 孵育15~30分钟，完成逆转录合成cDNA一链

3. 85℃ 加热5秒，高温灭活逆转录酶，终止反应

核心技术原理

茎环法逆转录是miRNA精确定量的金标准方法，核心原理如下：

1.‌茎环引物结合‌：设计带有茎环（stem-loop）二级结构的特异性逆转录引物，通过3'端6~8个与miRNA 3'端反向互补的碱基，精准识别并结合目标成熟miRNA。

2.‌序列延长‌：茎环结构本身为一段固定的通用序列，与短链miRNA结合后，将原本仅20~22nt的miRNA延长至约60nt，从而可进行后续PCR扩增。

3.‌特异性优势‌：茎环构象可有效避免引物与基因组DNA、前体miRNA或其他同源序列非特异性结合，显著提升检测特异性，特别适用于少量目标miRNA的精确定量。

核心性能特点

1.‌超高灵敏度‌：min低可检出‌pg级‌RNA模板，线性范围覆盖10 pg ~ 1 μg总RNA，适合低丰度miRNA检测

2.‌快速gDNA去除‌：42℃条件下仅需‌2分钟‌即可高效清除基因组DNA污染，无需额外纯化步骤

3.‌高热稳定性逆转录酶‌：采用HiScript II Reverse Transcriptase，50℃半衰期超过240分钟，55℃下可稳定反应60分钟，对具有复杂二级结构的RNA模板逆转录效率更高

4.‌优化缓冲体系‌：专门针对miRNA短链逆转录优化Buffer组分与浓度，max大化miRNA特异性逆转录产物生成

5.‌引物设计便捷‌：配套免费引物设计软件，输入miRNA名称或序列即可自动生成茎环逆转录引物和qPCR正向引物序列

关键注意事项

1.‌防止RNase污染‌：全程在洁净实验台操作，佩戴无粉手套和口罩，所有离心管、吸头均为RNase-free级别

2.‌RNA模板质量‌：推荐使用OD₂₆₀/₂₈₀在1.8~2.1、OD₂₆₀/₂₃₀ > 1.8的高质量RNA，避免降解或杂质抑制逆转录

3.‌引物设计原则‌：茎环引物3'端互补碱基数建议为6~8个，过多会增加非特异性，过少则结合效率不足

4.‌一管多靶标限制‌：理论上单管可混合多个茎环引物同时逆转录，但靶标数量过多会导致各miRNA的cDNA产量不均，建议单管不超过3~5个靶标

5.‌下游配套‌：推荐搭配诺唯赞MQ101 miRNA Universal SYBR qPCR Master Mix使用，不同品牌引物与预混液混用可能导致扩增效率下降

6.‌试剂使用‌：所有组分冰上融化，轻弹混匀后短暂离心，避免反复冻融，酶类组分尽量减少室温暴露时间